Na Holanda ocupada pelos nazistas, Otto Frank e sua família decidiram se esconder, devido às crescentes perseguições contra os judeus. O empresário Kraler e seu assistente Miep preparam um esconderijo nos quartos que ficam em cima de seu local de trabalho, e combinam com os Franks e outra família, os Van Daan, para ficar lá. Mais tarde, a eles se junta o dentista Dussel. Juntos, eles tentam evitar serem detectados, enquanto esperam a Holanda ser libertada pelos Aliados. Por isso satisfazer as necessidades básicas pode se tornar um desafio, e até mesmo pequenos incidentes poderia apresentar um sério risco de serem descobertos. Baseado no diário de Anne Frank, e na peça de teatro que foi adaptado a partir dele:
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